細胞污染的常見類型

細胞培養(yǎng)

細胞培養(yǎng)過程中即使我們再小心翼翼，還是會在不經意間出現(xiàn)細胞污染的情況，導致實驗無法繼續(xù)進行，可能是準備已久的實驗，一下子又回到了起點。本期就細胞污染的常見類型簡單向大家介紹一下。

實驗室細胞培養(yǎng)過程中的污染物主要有兩大類：化學污染和生物污染物。

一、化學污染

主要有培養(yǎng)基、PBS、血清和胰酶等試劑中的雜質，內毒素，洗滌劑殘留等。因此許多試劑在使用前需要過濾，清洗的物品一定要用超純水多清洗幾次并高溫高壓滅菌后使用。

二、生物污染

01 細菌污染

主要有白色葡萄球菌，大腸桿菌，假單孢菌、枯草桿菌等；細胞被污染后培養(yǎng)基會很快變黃變渾濁，在顯微鏡下可觀察到細胞間有細小菌體移動，在數(shù)小時內會出現(xiàn)細胞脫落漂浮，培養(yǎng)液中呈細沙狀。這種污染通常是操作不規(guī)范或無菌措施不到位等引起的。

02 霉菌污染

常見的有白念珠菌、酵母菌、黑曲霉、孢子菌等；細胞污染后可明顯觀察到呈現(xiàn)串珠狀的白色或黃色漂浮物，顯微鏡下可見絮狀交錯的菌絲或串珠狀的透明菌團生長在細胞之間，污染速度較慢，培養(yǎng)基依舊清澈，后期會在細胞間出現(xiàn)很多清晰珊瑚狀物，逐漸會長出黑色絲狀物。這種污染通常也是操作不規(guī)范或無菌措施不到位等引起的。

03 支原體污染

細胞被支原體污染后，培養(yǎng)液可不發(fā)生渾濁，短期內細胞沒有明顯的病理變化，細微變化也可由于傳代、換液而被緩解，因此不易被發(fā)現(xiàn)。只有當污染嚴重時才影響細胞增殖，甚至從培養(yǎng)器皿脫落。支原體可以與宿主細胞形成一個共生關系，使污染不斷擴大。主要來源于是已感染支原體細胞之間的交叉污染，支原體感染的血清和胰酶等。在情況較輕時可使用支原體清除劑。

04 黑膠蟲污染

污染后培養(yǎng)液不會渾濁，在高倍鏡下可觀察到細胞間有黑色顆粒在原地進行“布朗運動”，像小蟲游來游去。隨著污染加重，被污染的細胞生長緩慢，細胞狀態(tài)差，空泡化嚴重，甚至還可能導致細胞形態(tài)的改變。污染源主要來自于血清，如果出現(xiàn)污染，更換血清。

05 病毒污染

被污染的細胞不會產生形態(tài)變化及細胞病理現(xiàn)象，培養(yǎng)液清澈不混濁，少部分病毒會造成細胞變圓、腫脹，脫落。病毒可能來源于血清。

06 細胞交叉污染

在顯微鏡下可觀察到部分細胞形態(tài)與所培養(yǎng)的細胞形態(tài)有明顯差異，可能是兩種或兩種細胞以上的實驗同時進行，操作不當，使實驗耗材、試劑等混用而易造成的污染。

細胞培養(yǎng)中每次出現(xiàn)污染，不僅要丟棄污染的細胞、檢查各種試劑，還需要對培養(yǎng)箱進行徹底的殺菌消毒，我們致力研發(fā)的二氧化碳細胞培養(yǎng)箱配備高溫滅菌功能（可選“濕熱滅菌”），接近過度滅殺（1012）的標準要求，歡迎咨詢。

（發(fā)布于：2022-08-29）